طريقة “الأقراص الورقية المعدلة” لتقييم المبيدات الفطرية

1995 الطرق المثلى لاختبار وتقييم مبيدات الآفات وخلائطها

الدكتور محمد شكري عثمان

KFAS

المبيدات الفطرية الأقراص الورقية المعدلة الكيمياء

تستخدم هذه الطريقة لتقييم المبيدات الفطرية على الفطريات التي لا تكون جراثيم على بيئات صناعية. وتعتمد هذه الطريقة على طريقة الأقراص الورقية المستخدمة في اختبارات البكتريا. 

وتعد هذه الطريقة طريقة بطيئة نسبياً لان النتائج تطلب من 7 – 10 أيام. 

كما تعد طريقة كيفية qualitative وذلك لتسجيل النتائج على هيئة سالب وموجب وهي لا تحتاج إلى ميكروسكوب.  ويجري الاختبار على النحو التالي:

 

1– تجهيز الأجار

– قشّر وقطع 200 جم بطاطس في 500 مل ماء مقطرمعقم.

– أضف 10 جم اجار ويطهى الخليط لمدة 30 دقيقة.

– صفّ الخليط بعد الطهيّ من خلال قطعة قماش وأضف إلى الناتج 10 جم ديكستروز.

– عقّم الخليط في الأوتو كلاف عن 15 رطلاً لمدة 30 دقيقة.

 

2- تجهيز الاقراص الورقية

– ضع ورقة نشاف مربعة في طبق بتري بحيث تلامس جوانب الطبق .

– ضع 6 أقراس ورق ترشيح قطر كل منها 12,7 مم في صفين كل صف يحتوي على ثلاثة أقراص.

 

3- الادوات الزجاجية

الأدوات الزجاجية التالية تكفي لثلاثة تركيزات (5 مكررات / تركيز) ومقارنة:

– 17 شريحة من ورقة الترشيح                                     – 34 طبق بتري

– 5 دوارق معيارية 250 مل                                       – 1 دورق معياري 125 مل

– 11 دورقا معياريا 50 مل                                        – 1 ماصة 2 مل

– 10 ماصة 10 مل                                                   – 1 ساق زجاجية منتهية بعصا مطاطية 

 

4- تنظيف وتعقيم الأدوات الزجاجية (كما سبق الشرح)

5- صب الأجار في الأطباق البترية: يعد تبريد الأجار لدرجة 40°م يتم صبه في الأطباق البترية بمعدل 12,5 مل أجار ديكستروز البطاطس / طبق.

 

6- تحضير المحاليل القياسية المركزة لمعلق الفطر والمبيد .

أ- تحضير المحلول القياس المركز للمبيد: كما سبق

ب- تحضير محلول قياس مركز لمعلق الفطر: إذا كان الفطر يكوّن جراثيم فيحضر المعلق بنفس الأسلوب سالف الذكر.

– إذا كان الفطر لا يكوّن جراثيم فيحضر معلق ميسليم الفطر بخلط محتويات مزرعة الفطر مع الماء المقطر والمعقم باستخدام خلاط منزلي.

 

7- إجراء التجربة

– باستخدام ماصة 10 سم أضف إلى كل قرص من أقراص ورقة الترشيح 2 قطرة من محلول المبيد.  وبعد تشرب محلول المبيد وباستخدام ماصة 2 سم اضف قطرة من محلول معلق الفطر مع ملاحظة أن يتم ذلك في منتصف القرص.

– ضع الاقراص بعد معاملتها وتشربها لكل من محلول المبيد والفطر في أطباق تيري محتوية على الأجار (3 قرص / طبق).

– ضع الأطباق البترية في مكان مناسب.

 

8- تسجيل النتائجك بعد أسبوع من المعاملة يتم متابعة نمو الفطريات وتسجل النتائج على هيئة موجب (+) أو سالب (-) كل 48 ساعة. 

يسجل اقل تركيز يسبب تثبيطاً لنمو الفطر minimum inhibition concentration (MIC) وهي الجرعة التي لا تسبب نمواً للفطر لفترة أطول من 7 – 10 ايام وتستخدم لمقارنة كفاءة وفعالية المبيدات.

[KSAGRelatedArticles] [ASPDRelatedArticles]